Цельная кровь как образец для ИХЛА: что это даёт лаборатории
Коротко. Работа с цельной кровью исключает центрифугирование и отбор аликвоты — этап, который занимает 10–20 минут и требует оборудования, площади и рук оператора. Выигрыш проявляется не в паспортном времени измерения, а в реальном интервале от взятия пробы до выдачи результата. Наибольший эффект — в приёмных отделениях, небольших лабораториях и педиатрии.
Из чего складывается время до результата
Когда сравнивают анализаторы, обычно смотрят на время получения первого результата — 9, 12 или 17 минут. Но для клинициста значим не этот показатель, а полное время от взятия крови до появления результата в системе.
| Этап | Работа с сывороткой | Работа с цельной кровью |
|---|---|---|
| Взятие пробы | есть | есть |
| Доставка в лабораторию | есть | есть |
| Отстаивание для свёртывания | до 30 минут для сыворотки | не требуется |
| Центрифугирование | 10–15 минут | не требуется |
| Отбор аликвоты, маркировка | есть | не требуется |
| Измерение | 9–17 минут | 9–17 минут |
Из таблицы видно, где на самом деле теряется время. Ускорение самого измерения на несколько минут не компенсирует получаса пробоподготовки.
Что меняется организационно
- Оборудование. Не нужна центрифуга с соответствующим сервисом и поверкой, не нужны штативы и пробирки для аликвот.
- Площадь. Освобождается место под участок пробоподготовки — критично для лабораторий в приспособленных помещениях.
- Трудозатраты. Снимается несколько ручных операций на каждую пробу.
- Ошибки. Отбор аликвоты и её маркировка — классический источник перепутывания проб. Отсутствие этапа устраняет и риск.
- Объём крови. Для капиллярной пробы достаточно нескольких капель, что важно в педиатрии и при затруднённом венозном доступе.
Технические требования к платформе
Возможность заявить работу с цельной кровью — это не только про приём пробы. Система должна решать несколько задач:
- Перемешивание. Форменные элементы оседают, и без автоматического перемешивания результат будет зависеть от того, из какого слоя взята аликвота.
- Учёт гематокрита. Доля плазмы в пробе зависит от гематокрита, поэтому корректный пересчёт требует либо соответствующего модуля, либо алгоритмической коррекции.
- Устойчивость к интерференции. Гемолиз, липемия и иктеричность влияют на сигнал, и система должна их распознавать.
- Конструкция пробоотбора. Одноразовые наконечники исключают перенос материала между пробами.
Именно поэтому в сравнительных таблицах анализаторов строка «типы образца» информативнее, чем кажется: она отражает совокупность конструктивных решений, а не одну опцию.
Преаналитика остаётся критичной
Отказ от центрифугирования не отменяет требований преаналитического этапа. Публикации по влиянию преаналитических условий на результаты показывают, что нарушение сроков и температуры хранения искажает данные независимо от типа образца.
Что остаётся обязательным:
- правильный выбор антикоагулянта и соотношения кровь–антикоагулянт;
- соблюдение времени от взятия до измерения;
- исключение перегрева и замораживания;
- аккуратное перемешивание сразу после взятия;
- контроль за качеством венепункции: длительный жгут и травматичное взятие вызывают гемолиз.
Антикоагулянт выбирает не лаборатория, а инструкция к набору
Цельная кровь приходит в пробирке с антикоагулянтом, и его тип влияет на результат сильнее, чем принято думать. Цитрат натрия набирается в соотношении один к девяти и тем самым разбавляет пробу примерно на десять процентов — при количественном определении это систематическое занижение, если пересчёт не заложен. ЭДТА и гепарин на разные аналиты действуют по-разному: где-то различий нет, где-то смещение значимо.
Отсюда правило: допустимый тип пробирки указан в инструкции к конкретному набору реагентов, а не к анализатору, и переносить его с одного аналита на другой нельзя. Если в отделении используется одна пробирка на все исследования, перечень наборов проверяют заранее — иначе часть из них окажется невыполнимой на этом материале.
Как подтвердить, что цельная кровь равноценна сыворотке
Заявление производителя лаборатория подтверждает у себя — это часть верификации метода по ГОСТ Р ИСО 15189. Схема простая: у одних и тех же пациентов берут парные пробы, одну исследуют как цельную кровь, вторую центрифугируют и измеряют по сыворотке, после чего сравнивают результаты.
Практические ориентиры такие. Международная практика сличения методов предполагает не менее сорока проб, равномерно охватывающих рабочий диапазон, включая значения вблизи порогов принятия решений. Оценивают не среднюю разницу, а систематическое смещение и его зависимость от концентрации. Отдельно проверяют пробы с крайними значениями гематокрита — именно на них расхождение проявляется раньше всего. Результат сличения оформляется документом: он понадобится и при внутреннем аудите, и при разборе спорного случая.
Где выигрыш наибольший
| Сценарий | Что даёт работа с цельной кровью |
|---|---|
| Приёмное отделение, реанимация | Кардиомаркеры и маркеры воспаления без пробоподготовки: решение принимается на десятки минут раньше |
| Небольшая лаборатория | Нет нужды в отдельном участке пробоподготовки и дополнительном оборудовании |
| Педиатрия | Капиллярная кровь вместо венепункции, минимальный объём пробы |
| Выездные бригады и удалённые подразделения | Меньше оборудования, проще логистика |
| Стационар со срочными исследованиями | Сокращение полного цикла cito-исследования |
Ограничения
Работа с цельной кровью не универсальна. Не все аналиты допускают такой тип образца, и перечень определяется конкретным набором реагентов, а не платформой в целом. При планировании нужно сверять по каждой позиции меню, для каких образцов она валидирована.
Кроме того, для части исследований сыворотка остаётся предпочтительной по методическим причинам, а при необходимости хранения материала или повторного измерения аликвота всё равно потребуется.
Частые вопросы
Исключается центрифугирование и отбор аликвоты — этап, занимающий 10–20 минут и требующий оборудования и ручных операций. Полное время от взятия до результата сокращается существенно сильнее, чем на разницу в скорости измерения.
Да, доля плазмы в пробе зависит от гематокрита, поэтому платформа должна учитывать этот фактор конструктивно или алгоритмически.
Обязательно. Форменные элементы оседают, и без перемешивания результат зависит от слоя, из которого взята аликвота. В автоматизированных системах это выполняется прибором.
Зависит от платформы и от конкретного набора реагентов. Возможность работы с капиллярной кровью особенно важна в педиатрии и при затруднённом венозном доступе.
Нет. Перечень определяется валидацией каждого набора реагентов, поэтому его нужно сверять построчно по меню.
Нет. Сроки, температура хранения, качество венепункции и правильный антикоагулянт остаются критичными для достоверности результата.
Источники
- Pre-analytical conditions affecting the determination of plasma analytes. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, 2001. PMID 11592432
- PepS: An Innovative Microfluidic Device for Bedside Whole Blood Processing before Plasma Proteomics Analyses. Analytical Chemistry, 2021. PMID 33319979
- Point-of-care tests in suspected acute myocardial infarction: a systematic review. International Journal of Cardiology, 2013. PMID 24001699
- ГОСТ Р ИСО 15189 «Лаборатории медицинские. Частные требования к качеству и компетентности»
- ГОСТ Р ИСО 22870 «Исследования по месту лечения. Требования к качеству и компетентности»