РЭА-ИМБИАН-ИХА

В основе работы теста лежит метод качественного иммунохроматографического анализа.
При наличии в исследуемом образце РЭА в концентрации выше 5 нг/мл он связывается в области внесения пробы со специфичным конъюгатом. При этом формируется комплекс «антиген-антитело конъюгата», который мигрирует с током жидкости. В тестовой зоне (Т) происходит его взаимодействие с иммобилизованными на мембране антителами к РЭА с образованием окрашенного комплекса «антитело-антиген-антитело конъюгата». Наличие цветной линии указывает на положительный результат, а ее отсутствие – на отрицательный. Непрореагировавший конъюгат взаимодействует с антивидовыми антителами в области контрольной зоны (зона С) с образованием окрашенного иммунного комплекса. Цветная контрольная линия формируется всегда, независимо от наличия РЭА в образце.

Оборудование и материалы

• перчатки;
• центрифуга;
• таймер;
• холодильник с морозильной камерой;
• капиллярная трубка;
• 70 %-ный раствор спирта этилового и 6 %-ный раствор перекиси водорода (дез. растворы) или растворы иных дезинфектантов, разрешенных к применению СП 1.32322-08, кроме хлорсодержащих.

Допускается использование автоматических дозаторов.

Подготовка к проведению анализа

Перед использованием все компоненты набора и исследуемые образцы довести до комнатной температуры от +18 до +25 °С (пакет с тест-кассетой/тест-полоской выдерживать при указанной температуре до вскрытия!).

Все реагенты готовы к применению.

1. Взятие крови для анализа цельной венозной крови, а также крови для получения сыворотки и плазмы осуществляется в стандартных лабораторных условиях.
2. Для сбора образца капиллярной крови из пальца необходимо:

• вымыть руки с мылом теплой водой;
• помассировать руку движениями от предплечья до кончика четвертого (безымянного) пальца;
• вскрыть индивидуальную упаковку со спиртовой салфеткой для дезинфекции кожи;
• тщательно протереть подушечку безымянного пальца спиртовой салфеткой для дезинфекции кожи;
• проколоть подушечку безымянного пальца стерильным одноразовым ланцетом чуть в стороне от центра фаланги;
• стереть первую каплю выступившей крови ватным тампоном;
• аккуратно потереть руку от кисти до пальцев для формирования капли в области прокола.

Проведение анализа (тест-кассета)

1. Извлеките тест-кассету из индивидуальной упаковки, не касаясь окна для внесения образца, обозначенного символом «↑». Промаркируйте тест-кассету фамилией или кодовым номером пациента и положите устройство на ровную горизонтальную поверхность.
2. При исследовании сыворотки или плазмы:

• заполните одноразовую пипетку для внесения образца на объём ~100 мкл;
• удерживая пипетку вертикально, внесите последовательно 2 капли пробы (40 мкл) в круглое отверстие тест-кассеты, промаркированное знаком «↑» (рисунок 1);
• удерживая флакон-капельницу вертикально над круглым отверстием тест-кассеты, позвольте 1 капле буферного раствора (40 мкл) упасть в отверстие (рисунок 1);
• запустите таймер.

Для каждого образца необходимо использовать отдельную тест-кассету и пипетку.

При исследовании цельной крови из вены:

• заполните одноразовую пипетку для внесения образца на объём ~100 мкл;
• удерживая пипетку вертикально, внесите 3 капли пробы (60 мкл) в круглое отверстие тест-кассеты, промаркированное знаком «↑» (рисунок 2);
• удерживая флакон-капельницу над круглым отверстием тест-кассеты, позвольте 1 капле буферного раствора (40 мкл) упасть в отверстие (рисунок 2);
• запустите таймер.

Для каждого образца необходимо использовать отдельную тест-кассету и пипетку.

При исследовании цельной крови непосредственно из пальца:

• поместите палец над круглым отверстием тест-кассеты, промаркированным знаком «↑». Не касайтесь пальцем тест-кассеты и отверстия в ней!
• позвольте 3 каплям крови упасть в круглое отверстие (рисунок 3);
• удерживая флакон-капельницу над круглым отверстием тест-кассеты, позвольте 1 капле буферного раствора (40 мкл) упасть в него (рисунок 3);
• запустите таймер;
• место прокола закройте спиртовой салфеткой для дезинфекции кожи.

При исследовании цельной крови из пальца с помощью капиллярной трубки:

• заполните капиллярную трубку кровью из пальца, избегая попадания в неё пузырьков воздуха;
• перенесите 3 капли крови из капиллярной трубки в круглое отверстие тест-кассеты (рисунок 4), промаркированное знаком «↑»;
• удерживая флакон-капельницу с буферным раствором над круглым отверстием тест-кассеты, позвольте 1 капле буферного раствора (40 мкл) упасть в него (рисунок 4);
• запустите таймер;
• место прокола закройте спиртовой салфеткой для дезинфекции кожи.

Оцените результат реакции визуально через 10 минут. Не интерпретируйте результаты позднее 15 минут после внесения пробы.

Проведение анализа (тест-полоска)

Извлеките тест-полоску из индивидуальной упаковки. Промаркируйте тест-полоску фамилией или кодовым номером пациента и положите устройство на горизонтальную поверхность. Подготовьте подставку под микропробирки и установите микропробирки в отверстия. Подготовьте образцы для исследований, пипетку и буферный раствор.

Для образцов сыворотки или плазмы:

Вертикально удерживая пипетку, поместите 2 капли сыворотки или плазмы (около 50 мкл) в микропробирку, а затем добавьте 1 каплю буферного раствора (около 40 мкл). Далее поместите тест-полосу в микропробирку. Затем включите таймер.

Для образцов цельной крови из вены: вертикально удерживая пипетку, поместите 3 капли цельной крови (около 60 мкл) в микропробирку, а затем добавьте 1 каплю буферного раствора (около 40 мкл). Далее поместите тест-полосу в микропробирку. Затем включите таймер.

Для образцов цельной крови из пальца: при использовании капиллярной трубки: наполните капиллярную трубку и поместите около 60 мкл цельной крови из пальца в микропробирку, добавьте 1 каплю буферного раствора (около 40 мкл) и поместите тест-полоску в микропробирку. Затем включите таймер.

Оцените результат реакции визуально не менее чем через 10 минут. Не интерпретируйте результаты позднее 15 минут после внесения пробы.

Учет и интерпретацию результатов проводить согласно инструкции по применению.

Учет и интерпретация результатов:

Интенсивность окраски линий может меняться в зависимости от концентрации РЭА в исследуемом образце.

В случае получения недействительного результата анализ следует повторить с использованием другой тест-кассеты или тест-полоски набора.

Контроль качества

Данное изделие содержит внутренний контроль качества (розовая линия в контрольной области). Образцы для внешнего контроля качества должны быть протестированы в соответствии со стандартами контроля качества, установленными в вашей лаборатории.

Ограничения

1. Отрицательный результат анализа указывает на наличие РЭА в исследуемой пробе в концентрации менее 5 нг/мл.
2. Положительный результат анализа указывает на наличие РЭА в исследуемой пробе в концентрации более 5 нг/мл.
3. Положительный результат теста «РЭА-ИМБИАН-ИХА» может свидетельствовать о наличии у пациента злокачественных новообразований или рецидива рака. Положительный результат теста может наблюдаться у пациентов с доброкачественными заболеваниями кишечника, поджелудочной железы, печени и легких, а также у больных туберкулёзом, хроническими формами гепатитов, циррозом печени, при аутоиммунных заболеваниях и у заядлых курильщиков.
4. Положительный результат теста «РЭА-ИМБИАН-ИХА» может быть обусловлен проведением химио- и радиотерапии.
5. Положительный результат теста «РЭА-ИМБИАН-ИХА» является предварительным. Полученный результат анализа должен быть соотнесён с клинической картиной. Для уточнения диагноза необходимо проведение дополнительных клинических исследований с использованием альтернативных методов.
6. Отрицательный результат теста «РЭА-ИМБИАН-ИХА» позволяет судить об успешности терапии или эффективном хирургическом удалении злокачественного новообразования, отсутствии рецидивирующих процессов, ремиссии доброкачественной опухоли.
7. Отрицательный результат теста «РЭА-ИМБИАН-ИХА» не исключает наличие онкозаболевания, т.к. исследование может быть проведено на ранних стадиях развития опухоли.
8. Не использовать изделие с видимыми дефектами.